熒光定量PCR儀和普通PCR儀是兩種常用的基因擴(kuò)增技術(shù)，它們?cè)跈z測(cè)原理、檢測(cè)方法、檢測(cè)準(zhǔn)確性和應(yīng)用范圍等方面存在顯著差異。所以需要根據(jù)不同類型的PCR儀采用不同方法定期檢測(cè)校準(zhǔn)，才能確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

　　一、檢測(cè)校準(zhǔn)區(qū)別

　　普通PCR儀：通過(guò)PCR技術(shù)將特定的DNA片段在體外進(jìn)行指數(shù)級(jí)擴(kuò)增，擴(kuò)增過(guò)程中不涉及熒光信號(hào)的監(jiān)測(cè)，因此只檢測(cè)設(shè)備的溫度和濃度。

　　熒光定量PCR儀：在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，通過(guò)熒光染料或熒光探針標(biāo)記特異性地檢測(cè)目標(biāo)DNA片段的增加，利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況，因此需檢測(cè)設(shè)備的溫度和濃度、以及熒光部分。

　　相對(duì)來(lái)說(shuō)，熒光部分的檢測(cè)難度較大，檢測(cè)熒光部分還需要用到特定的標(biāo)物，所以檢測(cè)費(fèi)用更高。

　　熒光定量PCR儀在運(yùn)行過(guò)程中，容易出現(xiàn)控溫不準(zhǔn)、光路缺陷等問(wèn)題。我們主要對(duì)溫度示值誤差、溫度均勻度、溫度最大過(guò)沖量、平均升溫速率、平均降溫速率、Ct值示值誤差、均勻度和精密度、通道峰值高度一致性、線性靈敏系數(shù)、熔解溫度漂移、熔解溫度比(光學(xué)系統(tǒng)物理項(xiàng)目)、熒光強(qiáng)度精密度、樣本測(cè)量精密度、熒光線性相關(guān)系數(shù)、樣本線性相關(guān)系數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行定期檢測(cè)。這些檢測(cè)決定著基因擴(kuò)增各個(gè)步驟的有效完成，確保試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。